LUCS 13 是一种可渗透细胞的核酸染料，在与核酸结合后呈现绿色荧光。该染料具有高荧光产量，且结构与 SYTO™13 染料相同。

LUCS 13 用于对活的和死的真核细胞以及革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌中的 DNA 和 RNA 进行染色。染料被 488 nm 的蓝色激光激发。其荧光发射在荧光素通道中检测到，与 DNA 结合时峰值为 509 nm，与 RNA 结合时峰值为 514 nm。

该染料可用于同时标记细胞不可渗透的核标记物（例如 YoDi-3），以使用荧光显微镜和流式细胞术评估细胞活力。

协议

确切的方案取决于具体的细胞类型和实验任务。一般来说，可以描述如下：

1. 准备 50 µM LUCS 13 储备溶液。为此，将 990 µl 去离子水添加到 10 µl 5 mM LUCS 13 溶液中。储备液可以等分并冷冻以供长期储存。

2. 要制备 1 µM LUCS 13 工作溶液，请将 20 µl 50 µM LUCS13 库存添加到 980 µl PBS 中。

3. 以合适的方式小心地从生长表面去除贴壁细胞。对于悬浮细胞，从下一点开始工作。

4. 用冷 PBS（pH 7.4）清洗细胞一次。 300 g离心 5 分钟获得种子细胞 。

5. 将细胞在 1 ml 1 μM LUCS 13 工作溶液中于 37°C 孵育 30 分钟。

6. 300 g离心 5 分钟去除染料溶液 。

7. 用 PBS 清洗细胞一次。

8. （可选）如有必要，可以将细胞在含 3.7% 甲醛的 PBS 中固定 15 分钟，用 PBS 洗涤，然后用另一种染色剂重新染色。

重要的

• 处理 LUCS 13 溶液时请使用塑料瓶，因为稀释的染料可能会粘在玻璃上。

• 使用无磷酸盐缓冲液（例如盐水中的 15 mM HEPES）可获得更明亮的染色结果。

• 在开始实验之前，测试几种染料浓度范围从 10 nM 到 5 µM，以确定最佳的染料稀释度。染色结果受许多因素影响：生长培养基、细胞密度、其他细胞类型的存在、染色持续时间等。

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